在ceRNA相关的研究中,例如circRNA-miRNA-mRNA,或者lncRNA-miRNA-mRNA的靶向关系图谱,一般通过网络图呈现。首先可以肯定的是,网络图是一种清晰展示ceRNA网络结构的有效方法。
不过同一种类型的图见多了,多少会产生一些审美疲劳。那么,有没有其它的可替代方案呢?本篇则给大家带来一种别致的画风,使用冲击图(或桑基图)代替网络图描述ceRNA网络。
例如文献“Construction and comprehensive analysis of a ceRNA network to reveal potential prognostic biomarkers for hepatocellular carcinoma”中描述lncRNA-miRNA-mRNA关系的ceRNA冲击图。
冲击图(alluvial)、桑基图(sankey),名称傻傻分不清倒也没关系,很多情况下可以当作一类来看待。如何,上图中3者间的结构是不是也很清晰?如果您也心动了,下面就让我们重现该文献的样式,绘制冲击图展示ceRNA关系。
在原文献附录中,作者提供了上图lncRNA-miRNA-mRNA靶向关系的原始数据,可以直接在原文中获取。为了方便大家操作,我们已经下载了数据做了本地整理,并和R代码等一起打包,可点击这里获取。
示例文件
示例文件一共两个,“lncRNA_miRNA.txt”记录了lncRNA和miRNA的靶向关系,“miRNA_mRNA.txt”记录了miRNA和mRNA的靶向关系。
对应靶向关系
首先将示例数据读入到R中,由于lncRNA-miRNA-mRNA的关系是分两张表记录的,需要将它们整合到一起,做个关系对应。
#读取数据,两个靶向关系表
lncRNA_miRNA <- read.delim('lncRNA_miRNA.txt', sep = '\t', stringsAsFactors = FALSE)
miRNA_mRNA <- read.delim('miRNA_mRNA.txt', sep = '\t', stringsAsFactors = FALSE)
#整合靶向关系
ceRNA <- merge(lncRNA_miRNA, miRNA_mRNA, by = 'miRNA')
ceRNA$link <- 1
ceRNA <- reshape::melt(ceRNA, id = 'link')
variable <- summary(ceRNA$variable)
ceRNA$flow <- rep(1:variable[1], length(variable))
head(ceRNA) #查看整理后的数据结构
整理后的结构中:
variable指明为lncRNA、miRNA还是mRNA;
value为具体的分子名称;
flow为关系流,如果某lncRNA、miRNA和mRNA位于同一条靶向路径中,则flow中的数值是一样的。
R包ggalluvial的冲击图(桑基图)绘制
文件结构整理完毕后,绘制冲击图。
R语言中,绘制冲击图的R包其实有很多可以选择。考虑到ggalluvial包是示例文献中使用的作图R包,并且它延伸自ggplot2,语法结构和ggplot2是一致的比较简单易学,因此我们也以ggalluvial包的方法绘制冲击图。
#预指定颜色,lncRNA、miRNA 和 mRNA 总计 36 种,需指定 36 种颜色
mycol <- c('#8DD3C7', '#FFFFB3', '#BEBADA', '#FB8072', '#80B1D3', '#FDB462',
'#B3DE69', '#FCCDE5', '#BC80BD', '#CCEBC5', '#FFED6F', '#E41A1C', '#377EB8',
'#4DAF4A', '#984EA3', '#FF7F00', '#FFFF33', '#A65628', '#F781BF', '#66C2A5',
'#6181BD', '#F34800', '#64A10E', '#FF00FF', '#c7475b', '#049a0b', '#BEAED4',
'#FDC086', '#FFFF99', '#386CB0', '#F0027F', '#4253ff', '#ff4308', '#D8D155',
'#64495D', '#7CC767')
#ggalluvial 的冲击图
library(ggalluvial)
p <- ggplot(ceRNA, aes(x = variable, y = link,
stratum = value, alluvium = flow, fill = value)) +
geom_stratum() + #冲击图中的堆叠柱形图
geom_flow(aes.flow = 'forward') + #冲击图连线绘制
scale_fill_manual(values = mycol) + #颜色赋值
geom_text(stat = 'stratum', infer.label = TRUE, size = 2.5) + #添加 lncRNA、miRNA 和 mRNA 标签
scale_x_discrete(limits = c('lncRNA', 'miRNA', 'mRNA')) + #定义 lncRNA、miRNA 和 mRNA 列的展示顺序
labs(x = '', y = '') + #去除 x 轴和 y 轴标题
theme(legend.position = 'none', panel.background = element_blank(),
line = element_blank(), axis.text.y = element_blank()) #去除背景和图例
p
这样,文献中描述lncRNA-miRNA-mRNA关系的ceRNA冲击图就重现出来了,样式是不是也很漂亮呢?