使用抗生素是分子生物学实验常用方法,有许多筛选实验都需要用到抗生素。
下面整理部分抗生素的配置方法:
Amp 氨苄青霉素(Ampicillin)(100mg/ml)
溶解1g Amp钠盐于足量的水中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
Km 卡那霉素(Kanamycin)(50mg/ml)
溶解0.5g Km于足量的水中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
Cm 氯霉素(Chloramphenicol)(50mg/ml)
溶解0.5g Cm于足量的无水乙醇中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。常以50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
Tc 四环素(Tetracycline)(5mg/ml)
溶解50mg Tc于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
Str 链霉素( Streptomycin)(50mg/ml)
溶解0.5g Str硫酸盐于足量的无水乙醇中,定容至10ml。分装,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
Rif 利福平 (Rifampicin)(50mg/ml)
溶解0.5g Rif于足量的DMSO(二甲亚砜)中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。常以50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
利福平为橙红色片状结晶或砖红色结晶粉末。在183-188℃分解。易溶于氯仿和二甲基亚砜,溶于乙酸乙酯、甲醇和四氢呋喃,溶于水(pH<6)、丙醇和四氯化碳。干燥粉末可稳定5年以上,其水溶液在室温10h失效,但加入还原剂(如抗环血酸)可减少分解,在二甲亚砜中极稳定。
利福平溶解性:可溶于DMSO(100 mg/ml)、DMF、甲醇(16mg/ml)、氯仿(349mg/ml)、乙酸乙脂(108mg/ml)、丙酮(14mg/ml)、水(2.5 mg/ml, pH 7.3;1.3mg/ml,pH4.3)、95%乙醇(10mg/ml)、0.1N HCl(200mg/ml)、PBS(9.9mg/ml,pH7.4)。
Gm 庆大霉素 (Gentamicin)(50mg/ml)
溶解0.5g Gm于足量的水中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。
Spe壮观霉素(Spectinomycin)(100mg/ml)
溶解1g Spe于足量的水中,定容至10ml。分装,-20℃贮存。
乙酰丁香酮(AS)(0.1M)
0.0196g 乙酰丁香酮溶于1ml DMSO。过滤灭菌后100ul/管分装,-20℃贮存。
以上抗生素均需要在超净台中使用灭菌滤头过滤,其中水溶液使用水相滤头过滤(MILLEX GP PES),有机溶液使用有机相滤头过滤(GV PVDF)。