GEO(GENE EXPRESSION OMNIBUS),https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/,由美国国立生物技术信息中心NCBI创建维护的,是个公开的基因数据库,包含了测序和芯片数据。在前面,我们介绍过利用GEO数据库进行芯片数据检索,今天我们再进一步细化,如何利用GEO数据库下载信息。GEO数据包括五种,platforms、samples、series、datasets和profiles。
其中原始数据包括GPL、GSM和GSE。
GPL(GEOPlatform):平台信息,由芯片或测序公司提供,含有芯片或测序平台的描述信息,芯片还包含了其注释信息,每个平台列出了使用该平台的所有样本和系列。
GSM(GEO Sample):样本信息,记录单个样本的生物学信息,处理流程及该样本的原始数据(芯片或测序)。注意的是每个样本数据仅对应一个平台。
GSE(GSESeries):系列,将一项研究中所关联的GSM信息集合在一起,含研究名称、设计、概要信息。与GSM不同的是,GSE可以包含多个平台以及子系列,一个样本可以出现在多个系列中。
处理后的数据包含GDS和GEO Profiles。
GDS(GEO DataSet):经挑选整理的数据集记录,如进行背景校正、均一化处理。每个GDS对应一个平台。
GEO profiles:来源与GDS数据,可以展现单个基因表达水平。
GEO测序文件存储形式包含SOFT、MINiML、Series Matrix files以及Supplementary files。
SOFT和MINiML存储的内容相同,但格式不同。SOFT为ASCII格式,MINiML为XML格式。Series Matrix files则以制表符为分隔的包含每个样本具体数值的文本文件,包含GSM和GSE。Supplementary files列出GSM原始数据或一些样本临床信息。
接下来我们到了我们演示环节,首先进入GEO官网。官网首页含有GEO数据库的概要,一些工具菜单,GEO数据库概况以及对于上传者的操作指南。
我们在GEO首页搜索栏搜索自己待检索的关键词,如“PD-1”,则会显示GEO Datasets以及GEO Profiles中的结果,如需看基因表达谱,则选择GEO Profiles,如果其他信息,如GSE、GSM和GPL等。我们之前也介绍过,在NCBI界面中我们也可以快速进入GEO Datasets以及GEO Profiles。
这里我们现介绍GEO Profiles,选择Profiles,则出现以下界面,我们可以直接点击图形,查看表达谱,右侧按钮“Download profile data”可以下载该信息。
同样,我们以pdcd1-Autoimmune model:CD4+ T cells为例,点击该右侧表达谱,出现下图。我们可以看到该数据集是“GDS2460”,物种来源为“Mus musculus”。分组信息为两组,一组“wild type”,另一组为“sanroque”。两组表达“sanroque”高于“wild type”。另外左侧红色纵坐标数据对应“count”,右边蓝色则为“percentile rank with the sample”。灰色方块对应的是GSM***,点击它则可以查询到该样本信息,如下图。
下拉到底部,可以下载对应的信息。其中CEL格式对应Affymetrix芯片的原始数据。
点击“Download profile data”,可以下载表达信息,txt格式。我们可以看到GDS数据集是GDS3138,以及GSM信息,平台信息等。下载后可以利用EXCEl打开,或者利用其他分析软件处理。
下载GEO datasets信息:以搜索“PD-1”和“lung cancer”为例,通过概要选择自己需要的信息。我们可以看到Datasets(2),Series(311),samples(811),platforms(2)。
GPL对应数据包含annotation(注释信息),主要用于探针名和基因名切换。SOFT、MINiML格式包含GSM和GSE信息,比较大,一般不直接用于分析。
下拉到底部,我们可以看到该GPL的注释信息,点击“Download full table”,可以下载注释信息。
点击samples对应的GSM**,可以查询到样本信息,拉到底部,我们可以通过补充文件看到该样本的芯片表达数据。如“GSM4066172_KTM001_1392179_ClariomSmouse.CEL.gz”,表示gzip压缩的CEL格式文件,GSM4066172为样本编号,KTM001_1392179为样本分组信息
GSE数据,我们之前也介绍过,同样点击GSE***,下拉到底部,在“Download family”中有三个格式数据,SOFT、MINiML和Series Matrix file,前面两个为涉及到样本的信息和平台数据,内容比较大,我们通常选择Series Matrix file数据下载进行分析,该类数据经过矩阵化处理。同样,我们可以在补充文件中下载原始数据,http下载所有信息,或者通过custom下载部分样本信息。
值得注意的是,一个GSE可以按照平台形成多个Series Matrix file。
除了我们通过网站直接下载相应数据库信息,还可以通过ftp下载,ftp://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/geo/。
datasets/, platforms/ , samples/, series/,分别对应4 种数据类型 GDS、GPL、GSM 和 GSE。将数据编号的最后 3 位数字替换为 nnn。然后紧接数据编号,就可以直达文件的 ftp 存储页面。