以RFect病毒感染增强剂为例，讲解如何进行实验操作？
产品特点：
· 优异的病毒感染增强性能：可显著提升病毒对贴壁细胞的感染效率，在293细胞中，腺病毒的感染效率可提升50倍左右；
· 极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；
· 操作非常简便，只需先将增强试剂与病毒颗粒混合，再将该混合物直接加入培养细胞中即可。
方法步骤（以24孔板感染为例）:
A. 细胞准备：
病毒感染前一天对细胞进行转接，每孔接种细胞数在5x104左右，使接种病毒时的细胞密度在30-50%，培养过夜。
B. 病毒感染：
1. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的感染增强剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置3分钟。
2. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的病毒溶液，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置3分钟。
3. 将病毒-Trans buffer混合物滴加至RFect V-Trans buffer混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15分钟。注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。
4. 吸除旧的培养基，将步骤3制备的病毒混合物滴加至细胞培养孔内，轻轻晃动培养板以使混合物均匀分布，静置10分钟。
5. 向培养孔内加入新鲜的完全培养基，轻轻晃动培养板以使培养液均匀分布，将培养板转入培养箱继续培养。
6. 一般在培养24小时后更换新鲜培养基，如发现细胞生长状态有明显变化，也可在培养12小时后更换培养基。
7. 病毒感染48小时后，可荧光显微镜观察荧光表达情况，估计病毒感染效率，也可使用其它方法进行测定，再进行后续实验，如抗性筛选等。
注意事项：
· 感染前的细胞汇合度以30-50%左右为宜，感染时细胞生长状态应保持良好，不要有支原体污染。
· 根据经验或病毒的MOI，估算病毒的加样量，病毒加样量（uL）=（MOIx细胞数）/病毒滴度x103，病毒滴度单位：TU/mL。
· 初次进行病毒感染实验，建议进行适当的梯度摸索实验，如24孔板，可接种6孔细胞，每孔接种细胞数一致，1孔不加病毒作为对照，余5孔每孔接种病毒量分别为0.25xMOI 、 0.5xMOI、1xMOI 、 2xMOI、4xMOI 计算得出的病毒量。
· 部分病毒感染后可在48小时检测到目标基因表达，部分病毒则需要72小时或更长时间才能检测到目标基因的表达，研究者可每隔一定时间检测1次。
