操作步骤
1. 请自行准备：无水乙醇、无 RNA 酶 1.5mL 离心管。
2. 取出洗涤液，按以下操作：
a) 洗涤液 A：按终浓度 30%比例加入无水乙醇，如 7mL 加入 3mL 无水乙醇；21mL 加入 9mL 无水乙醇，充分混匀。
b) 洗涤液 B：按终浓度 70%比例加入无水乙醇，如 3mL 加入 7mL 无水乙醇；9mL 加入 21mL 无水乙醇，充分混匀。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在 37℃溶解，摇匀后使用。
3. 取无 RNA 酶的 1.5mL 离心管，加入 200μL 样本，4μLRNAConc.，混合均匀，再加入 200μL 裂解液及 20μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴 10 分钟。
4. 加入 0.9mL 无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响 RNA 的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内，将 700μL 上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心 1 分钟，弃收集管内废液。
6. 将吸附柱放回收集管内，将剩余溶液转移至吸附柱内，重复步骤 5。
7. 将吸附柱放回收集管内，加 500μL 洗涤液 A 至吸附柱内，静置 2 分钟，12,000 rpm 4℃离心 1 分钟，弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内，加 500μL 洗涤液 B 至吸附柱内， 12,000 rpm 4℃离心 1 分钟，弃收集管内废液。
9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心 3 分钟，离去残留的洗涤液。同时，按每份样本 30μL 取洗脱液（如 10 份提取样本，即取 300μL洗脱液），放置于灭菌 1.5mL 离心管，65℃预热 2 分钟。
10. 取出吸附柱，放入新的无 RNA 酶的 1.5 mL 离心管内，加入上述预热的 30μL 洗脱液，静置 2 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心 2 分钟，收集RNA 溶液。-70℃保存，或直接用于下一步实验。
注意事项
1. 为防 RNA 酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无 RNA 酶的容器和无 RNA 酶的超纯水。
2. 裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于 37℃水浴中溶解即可。4.为提高提取的 RNA 浓度，可以减少洗脱液用量，但最低不要少于 15μL 。
