实验方法
1.取一定的植物叶片组织,用液氮研磨成粉末装,加入65℃预热的TPS DNA 提取液600ul,充分混匀。
2.65℃水浴30min,期间颠倒混匀3-4次。
3.加入氯仿/异戊醇/乙醇(体积比为 400:20:80),混合摇匀。4℃ 12000 rpm 离心10min,转移上清至新的离心管中。(这一步可以忽略不进行,如果是想蛋白去除的干净一些,可以进行)
4.加入等体积的异丙醇,颠倒混匀,-20℃放置10 min。4℃ 12000 rpm 离心10 min,弃上清。
5.加70%乙醇500ul洗涤沉淀。4℃ 12000 rpm 低速离心5 min,弃上清,超净台吹干沉淀,加入30ulddH2O溶解DNA。
6.置于-20℃,保存。
TPS提取液配方(100ml)
1M Tris-HCl 10ml
0.5M EDTA 2ml
5M KCl 50ml
ddH2O 38ml