1. 随机抽样和超几何分布
1.1 考虑
6医生和19护士参加会议。25个名字在帽子里,随机抽5个名字。
抽到4个医生和1护士的概率多少?
如果每次抽取后将纸条放回:则概率分布符合二项分布(binomial distribution)
-
如果不放回:概率分布符合超几何分布。
-
如果与样本相比总体的数目很大,比如1000抽取10,因为不放回对后续抽取概率影响很小,概率分布也近似于二项分布。
1.2 不放回随机抽样
- 不放回抽取n个样品。总体包含a个成功个体和N-a个失败个体
-
X表示样品中成功个体数目
2. GO富集分析
比如要研究某gene list在CC类(cellular components)某term的富集显著性。
CC为前提条件,为整个总体。成功条件为注释到某个term。
1.Clusterprofiler
GeneRatio
分母 样本在CC中注释到多少基因
分子 样本中多少基因注释到CC中这个小term
BgRatio
分母 bgground(一般为某个物种)在CC中多少基因
分子 bgground在CC这个小类注释到多少基因
2.phyper
参数
phyper(q, m, n, k, lower.tail = TRUE, log.p = FALSE)
结果为抽取样本k,得到q个成功个体的概率
q 样本成功个体: 注释到某term的gene总数
m 总体成功个体:该物种注释到某term
n 总体失败个体:该物种注释到CC的总数-某term的数目
k 样本总数:注释到CC的gene总数那么p value如何计算呢:
p value概念:n个样本,观察到正好x个成功个体或大于x个的概率
p value = P(Observed x or more) = 1-P(Observed less than x) = 1 - phyper(q-1,m,n,k)
3.举例
background frequency:整个background set的gene被注释到某个GO term的数目
sample frequency:input gene list中被注释到某个GO term的数目
比如:
input list有10个gene。
研究S.cerevisiae的BP中term:DNA repair的富集,背景set含6442 genes,input list有5个gene被注释到DNA repair,
S.cerevisize物种中,有100genes被注释到DNA repair。
那么----------
sample frequency: 5/10
background frequency:100/6442
4.p值修正
p-adj:修正p值的多种方式
Bonferroni correction (“bonferroni”)
Holm (“holm”)
Hochberg (“hochberg”)
Hommel (“hommel”)
Benjamini & Hochberg (“BH”)
Benjamini & Yekutieli (“BY”)
5.background
enrich DO:
默认是所有有annotation的gene
universe参数可以设定backgroud