组织培养:习惯上泛指所有的体外培养。根据培养物的不同可概括为三个不同概念:细胞培养、组织培养和器官培养。
A、细胞培养(cell culture):将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞,做成细胞悬液,再培养于固体基质上,成单层细胞生长,或在培养液中呈悬浮状态培养的技术。
B、组织培养(tissue culture):将活体的一小片组织放在盛有培养液的玻璃或塑料培养器皿中,待组织块粘着后,沿底面平面移动生长的过程。
C、器官培养(organ culture):是指采取某些措施使器官的原基、器官的一部分或整个器官在体外存活、生长,并保持其原有结构和功能的培养技术。
贴壁培养(anchorage-dependent culture):细胞或培养物只有贴附于不起化学作用的物体(玻璃或塑料等无活性物体)的表面时才能生长、生存或维持功能。不能表明细胞属于正常或恶性转化
通常10代以内的培养物用作原代培养。
-- 有限细胞系(finite cell line):生存期有限的细胞系,不能继续传代或传代数有限(二倍体细胞)
-- 连续细胞系或无限细胞系(infinite cell line):获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,能连续传代 (异倍体细胞)
肿瘤细胞系或株� 是现有细胞系或细胞株中最多的一类,我国已建细胞系主要为这类细胞。肿瘤细胞系由癌瘤建成,多呈类上皮型细胞,常已传几十代或百代以上,并具有不死性和异体接种致瘤性。
接触抑制(contact inhibition):当一个贴壁生长的体外正常细胞生长至与另一个细胞表面相互接触时,抑制了细胞的运动。接触抑制是区别正常细胞和肿瘤细胞的标志之一
对于体外培养的细胞,应该把他们视作一种既能保持动物体内原细胞一定的性状、结构和功能又具有某些改变的、特定的细胞群体,而不能将之与体内的细胞完全等同。
细胞状态特征
1.培养细胞随贴附支持物形状不同而形态各异,最常见的是贴附于平面支持物细胞。
2.在一般光镜下生存的细胞是均质而透明的,结构不明显。
3.细胞在生长期常有1-2个核仁。
4.在细胞机能状态不良时,细胞轮廓会增强,反差增大。
5.若胞质中时而出现颗粒、脱滴和腔泡等,表明细胞代谢不良
传代:当细胞增殖达到一定密度后,则需要分离出一部分细胞和更新营养液,否则将影响细胞的继续生存,这一过程叫传代。