组装细菌基因组

1、下载SRA文件

以SRR11951410为例,从SRA数据库上用prefetch下载sra文件:

prefetch SRR11951410

2、Fastq-dump解压

cd SRR11951410/
fastq-dump --gzip --split-files SRR11951410.sra

3、Fastqc质控

fastqc SRR11951410_1.fastq.gz
fastqc SRR11951410_2.fastq.gz

FastQC报告
打开:SRR6466501_1_fastqc.html、SRR6466501_2_fastqc.html

4、Trimmomatic去接头

Trimmomatic 是一个广受欢迎的Ilumina平台数据过滤工具。
处理数据速度快,主要用来去除Illumina 平台的Fastq序列中的接头,并根据碱基质量值对Fastq进行修剪。
支持多线程,有两种过滤模式,分别对应SE和PE测序数据。

java -jar Biosofts/Trimmomatic-0.38/trimmomatic-0.38.jar Pforward_unpaired.fq.gz ./output_reverse_paired.fq.gz ./output_reverse_unpaired.fq.gz ILLUTRAILING:20 MINLEN:75

5、SPAdes组装基因组草图

SPAdes:
➢由俄罗斯科学院圣彼得堡理工大学计算生物学实验室开发,是目前评价最好的拼接工具之一。
➢主要用于基因组拼接,也可用于一、二、三代测序的混合组装;还可用于转录组从头组装(rnaSPAdes)和宏基因组拼接(metaSPAdes) 。

spades.py --careful --pe1-1 SRR11951410_1.fastq.gz --pe1-2 SRR11951410_2.fastq.gz -o ./SPAdesout_SRR11951410

报错:Not enough memory to run BayesHammer,内存不足。

解决:尝试使用seqtk抽取100000条。
(1)解压

gunzip -c output_forward_paired.fq.gz >output_forward_paired.fq
gunzip -c output_reverse_paired.fq.gz >output_reverse_paired.fq

(2)抽取100000条

seqtk sample -s 60 output_forward_paired.fq 100000 >seqtksample1_new.fq
seqtk sample -s 60 output_reverse_paired.fq 100000 >seqtksample2_new.fq

(3)用wc查看,可对比前后文件,判断是否抽取成功

wc -l output_forward_paired.fq
wc -l seqtksample1_new.fq

(4)然后,再次尝试SPAdes运行:

spades.py --careful --pe1-1 seqtksample1_new.fq --pe1-2 seqtksample2_new.fq -o ./SPAdesout.SRR11951410

6、Quast评价组装的基因组效果

对Spades结果进行评价:

quast.py SPAdesout.SRR11951410/contigs.fasta -o SPAdesout.SRR11951410/quast_out

查看输出的文件夹quast_out:

最后本地下载quast报告 report.html,并查看:

最后编辑于
©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 205,033评论 6 478
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 87,725评论 2 381
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 151,473评论 0 338
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 54,846评论 1 277
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 63,848评论 5 368
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 48,691评论 1 282
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 38,053评论 3 399
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 36,700评论 0 258
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 42,856评论 1 300
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 35,676评论 2 323
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 37,787评论 1 333
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 33,430评论 4 321
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 39,034评论 3 307
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 29,990评论 0 19
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 31,218评论 1 260
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 45,174评论 2 352
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 42,526评论 2 343

推荐阅读更多精彩内容