产品特点
◎操作简便快速,20分钟左右可获得理想的DNA;
◎提取DNA纯度高,无抑制剂,1.7
◎产量更高,较国内同类产品高出20%;
◎样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的血液样本。
产品介绍
BIOG Blood DNA Isolate Kit是专门用于血液DNA的提取纯化。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的基因组DNA,也可以直接提取得到血液中感染的细菌或转移的肿瘤细胞DNA, 省去了一般血液DNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤,操作简便快速,只需20分钟左右即可完成血液DNA提取,并且DNA提取得率较高,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因组DNA。BIOG Blood DNA Isolate Kit采用了最新的优质离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,提取得到的DNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
操作步骤(请自行准备无水乙醇、异丙醇和灭菌1.5mL离心管):
[if !supportLists]1. [endif]取出洗涤液,按以下操作:
a)洗涤液A:21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。
b) 洗涤液B:18mL加入42mL无水乙醇;36mL加入84mL无水乙醇,混匀。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。取1.5mL离心管,加入200μL血液样本,再加入200μL裂解液及40μL消化液,振荡混匀,65℃水浴10 分钟。
加入150μL异丙醇(总体积的25%),混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。
将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液;
将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液A至吸附柱内,静置1分钟,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
6. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
8. 按每份样本40μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取400μL洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。
9. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
10.取出吸附柱,放入新的1.5 mL 灭菌离心管内,在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 离心1分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
注意事项:
1.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
2.如血液量不足200μL,请用0.85% 生理盐水补至200μL;如血液量超出200μL,请使用BIOG中量血液DNA提取试剂盒或BIOG血液富集DNA提取试剂盒。
3. 如果提取的血液为鸟类、禽类的血液,因有核红细胞较多,提取血液量应适当减少,研究者应先进行优化实验,选择合适用量。
4.提取的DNA如暂不使用,应-20℃保存。