序列比对软件 MUMmer 高级使用(二)

快速上手的话见上一篇,这篇详细介绍一下 MUMmer 4 软件下 nucmer 程序的详细参数。

序列比对软件 MUMmer 快速上手(一)

nucmer 的应用场景为:比较两个 genome assemblies,或者将一个 assembly 或测序 reads 比对到另一个基因组,或者比较可能存在大量重排和重复的两个相关物种的基因组。

常用命令:

nucmer [options] <reference> <query>

其中,<reference> 为包含 multi-FastA 的序列文件,即要与之比对的参考基因组;<query> 为与参考基因组相同格式的文件,即要与参考基因组比对的基因组文件。

输出文件为:

out.delta

即 reference 和 query 之间的比对结果,可以进一步使用 show-* 程序进行处理。

该过程中可选的参数有:

--mum   #在 reference 和 query 中都是唯一的锚点匹配;

--mumreference   #使用在 reference 中唯一但 query 中不一定唯一的匹配(默认);

--maxmatch   #使用所有的匹配而不管其唯一性;

-c (--mincluster)   #用于聚类的匹配最低长度,默认为 65;

-l (--minmatch)   #单个匹配的最小长度,默认为 20;

-f / -r  (--forwoard / --reverse)  #只匹配正链或负链;

-g (--maxgap) #一个 cluster 中两个相邻匹配间的最大 gap;

-t (--threads)   #多核心;

-b (--breaklen)   #在对联配两端拓展式,在终止后继续延伸的程度,默认 200;

-p (--prefix)   #输出文件的前缀;

--[no]delta   #是否输出 delta 文件,默认是;

--depend   #显示依赖信息后退出;

--[no]extend   #是否外延,默认是;

等等,其它的可以通过 -h / --help 来进一步查看。

使用 -mum-mumreference 选项帮助减少 repeat induced alignments 的数量;

降低 --mincluster--minmatch 的值会提高比对的 sensitivity,但会减少获得更少的可靠比对结果;

在多个较大分化基因组之间进行比对时,显著提高 --maxgap 的值是必要的(比如增加至 1000);

设置 --noextend 可以防止 cluster 外延来加快进程,而 --nodelta 更进一步,甚至不对齐 cluster 中匹配的序列;该参数可以加快进程,但会减少输出中包含的信息量;

在不指定 -r-f 的情况下,nucmer 会将查询序列的 forward 和 reverse strands 与参考序列的 forward 进行匹配,输出坐标总是与参考序列的 forward strand 进行匹配。


如果想要进一步了解该软件的使用,可以进一步阅读我写的其它分享;

序列比对软件 MUMmer 结果文件解读(三)

序列比对软件 MUMmer 结果可读化处理(四)

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