们看看脂肪代谢组学和mRNA转录组学分析,文章的谋篇布局。
文献题目:脂质组学和转录组学鉴定德州驴肌内脂肪和内脏脂肪组织的异质性
背景:瘦肉里有脂肪,内脏有脂肪,为什么瘦肉里的脂肪吃起来不那么油腻呢,口感更好,而且更营养,是什么原因,研究一下脂肪的成分。
样本:
处理组:3头驴背最长肌(LDM),脂代谢组和转录组;
对照组:3头驴内脏脂肪组织(VAT),脂代谢组和转录组。
分析结果
1.脂质概况
定性脂质分析实现了IMF和VAT的良好分离(1A、B),正离子和负离子模式下的OPLS-DA明显分离(SA SB), 在驴LDM和VAT中分别鉴定出1146和1134种脂质,属于18个亚类,主要包括甘油脂质(GLs)、GP和SL(图1C、D),LDM中TGs和二酰甘油(DG)的相对含量显著低于VAT(p<0.001)....(思考:两组代谢组整体质控,分组,说明两组是有差异的,并做了大类脂质初步的比较)
2.脂肪酸的位置分布
TGs中饱和脂肪酸(SFAs)的百分比含量(12:0、14:0、16:0和18:0)在sn-3位置高于sn-1和sn-2位置,而PC和PE中SFAs的百分比含量在sn-1位置更高。此外,LDM中TGs的sn-2和sn-3位置16:0、PC中sn-1和sn-2位置14:0的百分比显著高于VAT(p<0.001)。相反,PC和PE中LDM的两个位置18:0的百分比明显低于VAT(p>0.001)(思考,比较两组不同类型的脂质)
3.不同的脂质分子和潜在的脂质标记物
补充图S2所示,110种脂质被鉴定为不同的脂质分子,其中与VAT相比,LDM中有72种下调,38种上调。(思考:做差异分析,找差异的脂质物)
图4A和补充表S2显示了前11种鉴别脂质的受试者工作特性(ROC)曲线和参数,ROC曲线下面积(AUC)为1,特异性为100%,对PC(O-18:2/18:2)、PC(O-18/2/18:1)、PC、PC(32:2)、PC和SM(d36:1)的敏感性为100%。这些潜在的脂质标记物包括5个PC、2个PE、2个PG、1个PI和1个SM,LDM中的归一化强度显著高于VAT,VAT中的归一化密度接近0(图4B–F)。(思考:ROC曲线分析,找标志物)
4.脂质代谢途径
用KEGG途径对110种脂质进行功能富集分析,显示LDM和VAT之间存在显著差异。这揭示了17种主要代谢途径的显著富集,包括花生四烯酸代谢、GP代谢、...(图5A)。胆固醇代谢、脂肪消化吸收...是最相关的代谢途径,如图5B所示。GL和GP代谢如图5C所示。GL代谢引起的DG和TGs在LDM中的表达显著低于VAT(p<0.05),而GP代谢引起的PC、PE、PS、PG和LPE在VAT中的表达明显低于LDM(p<0.05)。(思考,做代谢通路分析,并展示重要代谢通路)
5.脂质代谢途径中的基因表达
共鉴定出578个差异表达基因,其中与VAT相比,LDM中311个下调,267个上调(图6A)。RNA-seq分析显示,与VAT相比,LDM中GL和GP代谢相关基因的表达显著下调,与VAT相比,LDM中的溶血磷脂酰甘油酰基转移酶(LPGAT1)显著上调(图6B),差异表达基因的KEGG富集分析表明,调节GL、GP和鞘脂代谢以及脂肪酸降解的基因富集(图6C)。如图6D所示,使用KEGG途径对GL和GP代谢进行的功能富集分析显示,与VAT相比,LDM中GL代谢相关基因的表达显著降低(p<0.05),而GP代谢相关基因在LDM中的表达显著增加(p<0.05)。(思考:RNAseq分析,找差异基因,代谢通路等)
全文思考:(1)做脂质代谢组学,找二者的差异,(PCA差异,脂质大类差异,代谢物差异,代谢通路的差异,ROC曲线看标志物);
(2)做了一个代谢组学,找差异的基因,尽量跟代谢物能有些关联。
文献原文
Li M, Zhu M, Chai W, (2021) Determination of the Heterogeneity of Intramuscular Fat and Visceral Adipose Tissue From Dezhou Donkey by Lipidomics and Transcriptomics Profiling. Front. Nutr. 8:746684. doi: 10.3389/fnut.2021.746684
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