1. 分装病毒
保存于进口EP管,300u 一个
封装前充分震荡保存液
2. 机提核酸
- 准备深96孔板、试剂盒、样品300u、阳性对照(fluA、fluB)
- 96孔板中加入:
第一列:裂解液300u、PK10u、AC4u、磁珠10u、样本(最后加)
第二列:Wash Buffer Ⅰ 500u (用前混匀)
第三列:Wash Buffer Ⅱ 500u
第四列:Wash Buffer Ⅲ 550u
第五列:空
第六列:Elution B 30u - 最后先加样品,后加阳性对照;移液枪吹吸混匀。
- 充分反应10分钟后,上机器
3. 准备体系:25u
要分别准备fluA和fluB的体系
- T: 5u
- 5×buffer : 稀释至1×,也就是 5u
- dNTP:1u
- 引物 F: 0.2u;R:0.2u
- probe:0.2u (现配现用,母液1:10稀释)
- E :1u
- 水:剩余的:12.4u
4. 上机
- 将提取出的核酸与此前配好的体系分装入八连管中
- 注意:不要有气泡