单核细胞增多症的诊断首先是要了解患者的过去一段时间的病例和还要做一些身体检查。医生要看是否有发烧、发炎或喉咙痛、颈部淋巴结肿大,脾脏肿大。上颚可能出现红点(出血点)。一半的感染者会出现脾脏肿大,有10%在腹部检查时出现肝脏肿大。疑似患者还要通过抽血采样来测试血液计数和“单点”测试。如果“位置”正确,则诊断确认。但是在在4岁以下儿童或老年人中这个测试结果有可能是错误的。在这种情况下需要重复测试。
感染者,通常正常血液中淋巴细胞的数量增加,细胞在显微镜下看起来不寻常或“非典型”。大约1% -3%的人发现贫血,这是由于红细胞的破坏(溶血)。有一半的病人血小板计数可能低。
有几种抗体测试能够确定一个人是否过去或最近有过EB病毒感染。一些抗体发生在早期而且是瞬态,从而表明有新的或急性EB感染。这些包括IgM抗体病毒衣壳抗原(VCA)。其他抗体潜伏三到四个星期出现症状和并伴随人的一生,包括核抗原抗体(EBNA)。早期抗原(抗体EA免疫球蛋白)可能出现急性感染，可能会持续,也可能消失,或复发。在一些实验室中，聚合酶链反应测试对检测EBV DNA也是可用的。
许多医生使用三个实验室标准(淋巴球增多、10%或更多的淋巴细胞非典型性外周血涂片,和血清测试EBV)连同上述历史和物理研究证实诊断为急性传染性单核细胞增多。大约90%的成年人有抗体,表明他们过去曾经有过感染。
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