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分子克隆经验杂谈
7篇文章 · 7300字 · 2人关注
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    用primer5设计qRT-PCR引物

    设计原则：（如果没得选，这些原则也可适当放宽） 获取基因fasta文件 在NCBI-PMC-Gene搜索框Home - Gene - NCBI[...

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    大片段载体的分段构建二（两步PCR法）

    分步PCR的优点：对酶切位点没有严格的限制 缺点：非常容易产生突变，尤其是coincide的部位 以一个长达6800bp的目的基因AFAP1-A...

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    大片段载体的分段构建

    我们在构建一些大的基因片段时，由于基因片段过大，会导致单纯做PCR扩增时没法扩增出全长来。因此需要对基因做分段，PCR处理，这种情况有两种常用方...

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  • shRNA慢病毒载体合成步骤

    要进行shRNA载体构建，首先需要根据自己的基因，设计出对应的靶点、loop序列，酶切位点序列，详见LncRNA的shRNA慢病毒载体引物设计 ...

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    过表达载体合成步骤

    本文将介绍骨架载体+目的基因序列合成方法 在合成之前，应该先确定骨架载体backbone+基因序列。其中，骨架载体是根据自己的实验需要来决定。 ...

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    LncRNA 过表达慢病毒载体引物设计

    构建 lncRNA 过表达质粒或者慢病毒、腺病毒包装载体。原则上是将全长lncRNA 定向克隆到表达载体上实现 lncRNA 的过表达。然而有些...

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    LncRNA的shRNA慢病毒载体引物设计

    shRNA：小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA，shRNA)是一段具有紧密发...

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