PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride),是蛋白质印迹中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔径有大有小,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kDa的蛋白一般选用0.45um的膜,小于20kDa的蛋白则一般用0.22um的膜。PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度,是蛋白分离与免疫检测的理想载体。
近期,我们实验室购入了两款PVDF膜,同等电转条件下,我们进行了实验,转膜结果显示,两款PVDF膜都可将蛋白marker的各条带转到膜上,百代生物的PVDF膜上的条带似乎更为清晰一些,同时,我们也观察了膜后滤纸的情况,发现部分蛋白分子已经透过某厂家的PVDF膜转移到滤纸上,而百代的PVDF膜则能更好的结合蛋白分子,使其保留在膜上。之前也用过其他厂家的PVDF膜,膜后滤纸上出现蛋白条带的情况也很常见,没想到百代的PVDF膜蛋白结合性能出乎意料,相比于一般的PVDF膜,确实要更好些。当然,它的机械强度与坚韧度也是比较高的、耐热稳定性也不错。如果经常做WB实验的研究者,可以尝试一下。