产品特点
◎操作简便快速,毛囊预处理后,可在15分钟内完成操作;
◎提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9;
◎产率高,同样的样本量提取的DNA更多。
产品介绍
BIOG毛囊DNA提取试剂盒是我公司研发团队专为从毛囊中提取基因组DNA而设计,试剂盒采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的DNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
操作步骤:
1. 请自行准备:无水乙醇、1.5mL离心管。
2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:
a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇,混匀;9mL加入51mL无水乙醇,混匀。
b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇,混匀;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。
c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
3. 取1-6根剪去毛发的毛囊,置于1.5mL离心管中,加入200 μL 裂解液,20μL消化液B,旋涡振荡15秒,56℃水浴30 分钟,再旋涡振荡15秒,56℃水浴30 分钟。 如样本已充分消化裂解,进入步骤4,;如样本未完全消化裂解,再次旋涡振荡15秒,56℃水浴至完全裂解。
4. 加入20μL消化液A,56℃水浴10 分钟。5000rpm离心5分钟,将上清吸至另一1.5mL 离心管。
5. 加入550μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。
6. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内(注意所有絮状物要一并转入),静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
9. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-50 μL洗脱液,静置3分钟,12,000 rpm 4℃ 离心2分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
注意事项:
1、如毛囊组织较少,请选择使用百代生物BIOG微量毛囊DNA提取试剂盒(货号:51053-N/51044-N)。
2、析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
3、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。