多克隆抗体(2)

抗体(antibody,Ab)是机体 B 淋巴细胞受到抗原刺激后所产生的特异性球蛋白,故亦称为免疫球蛋白

机体初次接触抗原后,激发机体产生的特异性抗体亲和力低、持续时间短;而当同一抗原再次刺激机体后,则能产生高亲和力、高效价、持续时间长的抗体。由于抗体能与相应的抗原发生特异性结合反应,因此特异性抗体是免疫学实验中常用的试剂,不仅对于抗原的分析鉴定和定量检测极为重要,而且广泛应用于临床疾病的诊断、治疗和预防中。

在免疫学检测中应用的主要抗体是多克隆抗体和单克隆抗体,多克隆抗体常用免疫动物的方法获得,而单克隆抗体则采用杂交瘤技术制备。

抗体的制备流程

优质免疫血清的产生,主要取决于抗原的纯度和免疫原性,动物的应答能力以及免疫程序(如免疫途径、抗原剂量、注射次数、时间间隔、有无佐剂等因素)。因此制备高质量的抗体必须具备理想的免疫原、适宜的动物和切实可行的免疫方案。

(一)免疫动物的选择

免疫用的动物主要为哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、豚鼠及小鼠等。选择动物要依据抗体制备的条件而定。1.抗原与动物的种系 抗原的来源与免疫动物之间种系关系越远,其抗原免疫原性越强,越易产生免疫应答;反之,种系关系越近,则抗原免疫原性越弱。如用鸡球蛋白免疫亲缘关系较近的鸭或鹅,则免疫原性较差。2.动物的个体状况 动物的年龄与健康状况可影响产生抗体的效价,年龄太小者易产生免疫耐受,而年老体衰者免疫应答能力低下,不易产生高效价的抗体。所以用于制备抗血清的动物必须是适龄、健壮、体重合乎一定要求的健康动物。免疫过程中应特别注意营养和卫生管理。3.抗体的用量和要求 动物的选择常根据抗体的用途和量来决定。制备量大的抗体常选择羊、马等大动物;如所需抗体的量少,宜用小动物,如家兔、豚鼠等。对蛋白质抗原大部分动物均适合,常用家兔和山羊。制备供补体试验用的抗体可选择豚鼠。

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