西洋参属于五加科的中药,具有补气、养阴、清热、生液功效。中国占世界上国际西洋参市场的近三分之一。西洋参的是一种药食同源中药,既可以用于食用也可以药用。虽然西洋参运用广泛,但是中国药典中仅选取三个成分作为质量评价标准,导致评价体系过于片面,忽视了中医整体观的理论,因为很多时候这三种成分并不是西洋参发挥药效的主要成分,也不是西洋参中的独有的成分。
因此,黑龙江中医药大学的王喜军教授(方证代谢组学的提出、血清药物化学的领军科学家),对西洋参治疗气虚的功效,并根据2016年刘昌孝院士提出的质量标志物概念,通过中医理论的方法发现西洋参的代表性成分(质量标志物),发现能够代替西洋参中的两种成分(伪人参皂苷F11和人参皂苷Rd)为代表性成分,最终达到中药质量控制标准的提升。
方法
对比饲喂了不同样品的大鼠后,采集各组大鼠的血液和尿液,将样品注入UPLC-MS分析其中成分差异,建立统计学方法,例如OPLS-DA和PCA对不同组小鼠的血清和尿液中的差异成分比较。同时将西洋参样品也注入UPLC-MS进行成分分析,建立合适的色谱条件。
比较小鼠胸腺和脾脏系数(体重与脏器重量之比)。检测血清IL-2、GM-SCF、EPO和红细胞膜Na+-K+-ATPase等各项和气虚炎症相关的指标含量活性。检测红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)和白细胞(WBC)等血象。评价气虚血虚小鼠模型是否成功复制。
通过自主开发的软件平台PCMS将血清和尿液中的成分与西洋参中的成分进行联系,确定究竟是西洋参中的何种物质成分导致给药后的大鼠中的血清和尿液成分发生了变化。
结果
发现给药后大鼠的气虚症状发生了明显改善,这一点是和西洋参固有的临床疗效是一致的。
5个尿液和16个血清中的差异性指标成分被鉴定,并且通过数据库的比对和软件的处理,将这些成分进行分析,得到影响的体内代谢通路研究结果。
对西洋参方剂中的成分分析结果显示,其中102种成分发现,其中38种成分来自于西洋参。同时大鼠的血清中成分显示,其中14种成分是在大鼠体内结构未发生变化的成分。
最后通过软件,将14种成分是在大鼠体内大鼠体内结构未发生变化的成分与治疗气虚的疗效关联,确定5个成分可能是与疗效呈现高度相关的。考虑到质量标志物必须是西洋参中原有成分,所以最后从5个成分中选取了2种在西洋参中存在的化合物,即伪人参皂苷F11和人参皂苷Rd。
结论
所以通过这种整体观筛选出的成分,它不是以单个成分,或者少数几个成分对药效的贡献进行割裂的研究。而是通过一次性测定上百个方剂中的化合物,测定给药后大鼠的血清和尿液的西洋参成分,然后测定治疗后大鼠中的成百上千种化学成分的变化。将西洋参中成分-大鼠血清和尿液中西洋参成分-大鼠中血清和尿液中引发体内发生变化的物质进行关连后。就能知道到底是西洋参中的哪种成分进入大鼠体内发挥效应的。
参考文献:
Discovery of quality-marker ingredients of Panax quinquefolius driven by high-throughput chinmedomics approach