BIOG产品特点
◎操作简便快速,可在30分钟内获得理想的DNA,适用于一次处理较多样本的批量提取;
◎提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9;
◎采用自主研发的改性硅基磁珠,同样的样本量提取的DNA更多;
◎可用于小量(200μL)血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液、水样等液体样本中游离DNA的提取。
BIOG操作步骤
1. 请自行准备:无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管。
2. 取出洗涤液,按70%比例加入无水乙醇,如6mL加入14 mL无水乙醇,12mL加入28 mL无水乙醇,混匀。
3. 取1.5mL离心管,加入200μL 裂解液、20μL 消化液、4μL DNA Carrier,再加入200μL样本,振荡混匀,58℃温育10 分钟。
4. 取出离心管,冷却到室温,加入300μL异丙醇,充分混匀,再加入20μL磁珠复合液(每次使用前须充分混匀),振荡混匀3min(注意不要颠倒混匀,以防磁珠粘附于管盖内壁),静置2min。
5. 将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。
6. 加入800μL配制后的洗涤液,将离心管从磁力架上取下,充分振荡2min,确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。
7. 将离心管从磁力架上取下,开盖,干燥约3-5min,至无明显乙醇气味。
8. 加入50 μL洗脱液,振荡至磁珠充分散开,室温静置2min,再振荡混匀1min。
9. 将离心管置于磁力架上,待磁珠完全吸附后,小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中,提取的核酸可直接用于下游实验,或-20℃保存备用。
注意事项:
1. 裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。2. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于 37℃水浴中溶解即可,洗涤液在使用前应加入无水乙醇充分混合。