原始数据到Counts数据(一) - Read2Counts.pl

写在前面

写了一个脚本,整理了一些命令。方便课题组所有人,具体功能是:

从Fastq格式的数据直接到Counts数据

下面介绍用法,

输入数据

  1. 也可以直接从NCBI下载数据之后进行转换(如果已经有原始数据,那么可以跳过
    首先是准备一个SRA编号的列表
vim SRAlist.txt

内容如下

SRR3080054
SRR3080055
SRR3080055
SRR3080057
SRR3080058
SRR3080059

使用以下命令下载

for file in `cat  SRAlist.txt`;do perl -e '$id=shift;$prefix=substr($id,0,3);$run=substr($id,0,6);system qq{aria2c -j 20 ftp://ftp-trace.ncbi.nih.gov/sra/sra-instant/reads/ByRun/sra/$prefix/$run/$id/$id.sra}' $file;done

使用以下命令,进行数据转换,那么我们会得到1.样本数据文件

for file in *.sra;do
fasterq-dump --split-3 $file
done 

1.样本数据

ls -1  S*.fastq
SRR3080055.sra_1.fastq
SRR3080055.sra_2.fastq
SRR3080056.sra_1.fastq
SRR3080056.sra_2.fastq
SRR3080057.sra_1.fastq
SRR3080057.sra_2.fastq
SRR3080058.sra_1.fastq
SRR3080058.sra_2.fastq
SRR3080059.sra_1.fastq
SRR3080059.sra_2.fastq

整理成一个表格

ls S*.fastq|paste - - > sample.list.txt
cat sample.list.txt

表格内容如下

SRR3080055.sra_1.fastq  SRR3080055.sra_2.fastq
SRR3080056.sra_1.fastq  SRR3080056.sra_2.fastq
SRR3080057.sra_1.fastq  SRR3080057.sra_2.fastq
SRR3080058.sra_1.fastq  SRR3080058.sra_2.fastq
SRR3080059.sra_1.fastq  SRR3080059.sra_2.fastq

2.参考基因组

A_subgenome.fa

3.基因结构注释信息

A_subgenome.gff3

运行流程

perl /tools/XiaLabRNAseqPipe/Read2Counts.pl A_subgenome.fa sample.list A_subgenome.gff3

然后就等着就可以了

对于数据太多,硬盘空间有限

一次只运行10个样品,然后清理所有bam 和 bai

paraNum=10
ls *.fq.gz|paste - - |split -l $paraNum --additional-suffix .cc
for file in *.cc;do perl /tools/XiaLabRNAseqPipe/Read2Counts.pl /home/XiaLab/LabGenome/Litchi_Final_Genome/Lchinesis_genome.Chr.fasta $file /home/XiaLab/LabGenome/Litchi_Final_Genome/Lchinesis_genome.Chr.gff3;/bin/rm -r *.bam *.bai;done
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