操作步骤
1. 请自行准备：无水乙醇、异丙醇、1.5mL 灭菌无 RNase 离心管、10mL 灭菌无 RNase 离心管、10mL 无菌注射器。
2. 取出洗涤液，按以下操作：
a) 洗涤液 A：70mL 加入 30mL 无水乙醇；140mL 加入 60mL 无水乙醇，混匀。
b) 洗涤液 B：30mL 加入 70mL 无水乙醇；60mL 加入 140mL 无水乙醇，混匀。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在 37℃溶解，摇匀后使用。
3. 取 10mL 灭菌无 RNase 离心管，加入 1.5mL 血清(血浆或胸腹水) ，4uLCarrier，再加入 1.5mL 裂解液及 150μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴 15 分钟。
4. 加入 3mL 异丙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响 RNA 的提取与后续实验。
5. 将富集吸附柱放在抽滤装置上，再将 10mL 无菌注射器针筒插入富集吸附柱上端，将上述溶液转入针筒内，静置 2 分钟，真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕（约 2-10 分钟，注意不要抽滤太干，太干不利于后续步骤开展）。
6. 向针筒内加 3mL 洗涤液 A，真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕（约 1-5 分钟，注意不要抽滤太干，太干不利于后续步骤开展）。
7. 向针筒内加 3mL 洗涤液 B，抽滤约 2 分钟。
8. 按每份样本 40μL 取洗脱液（如 10 份提取样本，即取 400μL 洗脱液），放置于灭菌 1.5mL 离心管，65℃预热。
9. 将富集吸附柱放入收集管内，12,000 rpm 常温离心 2 分钟，离去残留的洗涤液。
10. 取出富集吸附柱，放入新的 1.5mL 灭菌无 RNase 离心管内，加入 40 μL 预热的洗脱液，静置 2 分钟，12,000 rpm 常温离心 2 分钟，收集RNA 溶液。提取的 RNA 即可用于下一步实验或-70℃保存。
特别说明：
1、由于 RNA 容易降解，提取实验所用器具应除去 RNA 酶，实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的 RNA 溶液可适当加入 RNA 保护因子。
2、本试剂盒配套 BIOG 真空核酸提取装置使用，可提取 1.5mL 之内量的血浆、血清和胸腹水 RNA，研究者可根据实验需要选择适当量的样本进行提取，所用试剂需按比例调整；
3、洗涤液要加入乙醇混匀后使用，配制后的洗涤液如一次使用不完，可 2-8℃密封放置，一周内使用完毕；
4、在裂解液刚刚抽滤完毕后，加入洗涤液 A；在洗涤液 A 刚刚抽滤完毕后，加入洗涤液 B，以防滤膜干燥；
5、裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗。
6、裂解液、洗涤液如有白色絮状物析出属正常现象，置于 37℃水浴中溶解即可。
